【摘要】 目的 对土壤来源的Streptomyces sp.3423代谢产物中的抗肿瘤活性成分进行分离纯化和结构鉴定。方法 采用MTT法，以对K562细胞的抑制活性为指标，筛选活性菌株。发酵培养液经各种色谱技术分离纯化，并通过对其理化性质、质谱、紫外、红外和核磁共振等图谱数据分析，确定化合物的结构。结果和结论 Streptomyces sp.3423代谢产物中分离得到6个已知化合物。生物学活性研究发现化合物3，4对K562细胞具有抑制活性，其中化合物4活性最强，IC50为14.1μg/ml。
【关键词】 土壤放线菌 环二肽 抗肿瘤活
本实验室建立了K562细胞和对格列卫耐药的K562细胞体外筛选模型［1］，通过筛选1000株土壤微生物发酵液，发现其中十余株放线菌的发酵液对K562细胞生长有强的抑制活性。选取其中一株放线菌3423，对其进行扩大发酵，并对代谢物进行提取、分离纯化、结构鉴定及活性研究。
1 材料与方法
1.1 仪器与材料
色谱包括分析型液相色谱仪(大连依利特公司)，Kromasil色谱柱(4.6mm×150mm，5μm)，配备UV230+型UVVIS检测器，制备型高效液相色谱仪(大连依利特公司)Spherisorb色谱柱(10mm×250mm，10μm)；核磁共振谱(Varian，Inova 600x型核磁共振仪)；质谱(Micromass Zabspec型质谱仪)；制备薄层(HSGF254烟台化工研究院)；反相硅胶ODS(J.BAKER)；柱层析及薄层层析用硅胶为青岛海洋化工厂生产；所用试剂为分析纯。
实验菌株是分离自我国江苏地区土壤的放线菌，分离保存方法见文献［1］，本实验选择菌株代号为3423。
1.2 发酵
首先将菌种涂布于平面培养基［成分(%)：可溶性淀粉1，葡萄糖2，牛肉膏0.1，酵母提取物0.4，NaCl0.2，K2HPO4 0.025，CaCO3 0.2，琼脂1，pH=7.2］上，30℃培养6d，挑取多个单克隆菌落接种于种子培养基(成分同平面培养基)上，30℃培养48h，显微镜下观察菌体形态，选择较好的一株作为菌种接种于发酵培养基(成分同种子培养基)，于摇瓶中振荡培养(250ml/500ml)，30℃培养72h。发酵终点pH为6.8左右。
1.3 提取
发酵液经离心得到菌丝体和上清液，菌丝体经丙酮浸泡12h、过滤、减压浓缩至无丙酮，乙酸乙酯提取三次；上清液加入AB8大孔吸附树脂，搅拌吸附8h，过滤，AB8用丙酮解吸附，减压浓缩至无丙酮，加等体积乙酸乙酯提取两次；合并菌丝体及发酵液的乙酸乙酯提取液，经无水硫酸钠干燥、过滤和减压浓缩至褐色浸膏(2g)。
1.4 分离与纯化
初提物(1.8g)采用C18反相色谱分离
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